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紫外分光光度計(jì)的入門知識講解
  • 發(fā)布日期：2017-03-23      瀏覽次數(shù)：1956
      • 　　紫外分光光度計(jì)采用一個(gè)可以產(chǎn)生多個(gè)波長的光源更合理，通過系列分光裝置，從而產(chǎn)生特定波長的光源我有所應，光源透過測試的樣品后過程中，部分光源被吸收去突破，計(jì)算樣品的吸光值，從而轉(zhuǎn)化成樣品的濃度達到。樣品的吸光值與樣品的濃度成正比智能設備。分光光度計(jì)已經(jīng)成為現(xiàn)代分子生物實(shí)驗(yàn)室常規(guī)儀器。常用于核酸蓬勃發展，蛋白定量以及細(xì)菌生長濃度的定量特點。
      　　分光光度計(jì)要測量的樣品必須是均一的溶液，不能有沉淀重要性，如果有沉淀的話就要搖勻又進了一步。而分光光度法則是通過測定被測物質(zhì)在特定波長處或一定波長范圍內(nèi)光的吸收度多種場景，對該物質(zhì)進(jìn)行定性和定量分析。
      　　常用的波長范圍為：200～400nm的紫外光區(qū)新的力量；400～760nm的可見光區(qū)先進水平；2.5～25μm的紅外光區(qū)。
      　　所用儀器為紫外分光光度計(jì)去創新、可見光分光光度計(jì)（或比色計(jì)）、紅外分光光度計(jì)或原子吸收分光光度計(jì)緊迫性。為保證測量的精密度和準(zhǔn)確度結構，所有儀器應(yīng)按照國家計(jì)量檢定規(guī)程或本附錄規(guī)定，定期進(jìn)行校正檢定高效。
      　　單色光輻射穿過被測物質(zhì)溶液時(shí)溝通協調，被該物質(zhì)吸收的量與該物質(zhì)的濃度和液層的厚度（光路長度）成正比，其關(guān)系如下式：1 A=log—=ECL T體系；式中A為吸收度保障性；T為透光率；E為吸收系數(shù)責任製，采用的表示方法是(E1％1cm),即吸收度換算成溶液濃度為1％(g/ml)十分落實，液層厚度為1cm的數(shù)值；C為100ml溶液中所含被測物質(zhì)的重量規則製定，g(按干燥品或無水物計(jì)算）製造業；L為液層厚度，cm關規定。
      　　物質(zhì)對光的選擇性吸收波長發展基礎，以及相應(yīng)的吸收系數(shù)是該物質(zhì)的物理常數(shù)。當(dāng)已知某純物質(zhì)在一定條件下的吸收系數(shù)后,可用同樣條件將該供試品配成溶液建強保護，測定其吸收度,即可由上式計(jì)算出供試品中該物質(zhì)的含量同期。在可見光區(qū)，除某些物質(zhì)對光有吸收外使命責任，很多物質(zhì)本身并沒有吸收,但可在一定條件下加入顯色試劑或經(jīng)過處理使其顯色后再測定,故又稱比色分析效果。由于顯色時(shí)影響呈色深淺的因素較多，且常使用單色光純度較差的儀器合規意識，故測定時(shí)應(yīng)用標(biāo)準(zhǔn)品或?qū)φ掌吠瑫r(shí)操作長期間。
     
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