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紫外分光光度計測BSA濃度曲線時注意事項
發(fā)布日期:2017-03-21 瀏覽次數(shù):6123
BSA即為牛血清白蛋白開展試點,在生化實驗中有廣泛的應用了解情況。BSA濃度可根據(jù)紫外分光光度計由曲線測得,到底是怎么一回事呢廣泛應用?
紫外分光光度計測量蛋白濃度酬P註度?捎媒?jīng)典公式:
蛋白的濃度(mg/ml)=1.4280-0.74A260;
也可同時讀取一系列倍比稀釋的已知蛋白含量的標準液的光密度值哪些領域,做出標準曲線更讓我明白了,后換算出濃度。
紫外分光光度計測試需注意的是:
1.用于儀器調零的液體與待測樣品一致積極,標準蛋白也要使用同樣的溶液探索;
2.光密度值應該在0.1-0.8之間;
3.要求蛋白質溶液*透明產業;
4.對含量很低的蛋白質溶液可使用215/225nm的波長測定滿意度;
5.使用蛋白質濃度范圍為0.1-1.0mg/ml。
配制濃度約為10mg/ml的BSA溶液可持續,然后按一定倍數(shù)稀釋主要抓手,至低濃度為0.017mg/ml,用紫外分光光度計測試這一系列的BSA溶液的吸光度構建,做出標準曲線很重要。根據(jù)測量結果而知,用紫外分光光度計測試牛血清白蛋白(BSA)的濃度覆蓋,濃度太高曲線將逐漸平緩異常狀況,而在0.02-2.0mg/ml濃度之間研究,基本能呈現(xiàn)出較好的線性。
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